Nejat İşler, 29 Şubat 1972’de İstanbul’un Eyüp semtinde dünyaya geldi. İşçi bir ailenin torunu olarak büyüyen İşler, ilkokulun ardından Cağaloğlu Anadolu Lisesi’nde eğitimine devam etti. Lise yıllarında tiyatro koluna katılarak sahneyle tanıştı; ancak akademik başarıdan çok sosyal yönüyle öne çıktı.
Liseden sonra üniversiteye yerleşemeyen İşler, geçimini sağlamak için çeşitli işlerde çalıştı. Bir dönem organizasyonlar düzenledi, ardından Mahmutpaşa’dan temin ettiği ürünleri Teşvikiye’de satarak ticaretle uğraştı. Yaz aylarında tişört, kışın ise kitap, dergi ve plak satışı yaptı. Daha sonra Yıldız Teknik Üniversitesi Fotoğrafçılık bölümünü kazansa da askerlik nedeniyle eğitimine devam etmedi.
Yaklaşık on yıl süren ticaret hayatının ardından, Dünya Tiyatrolar Günü’nde izlediği Danton’un Ölümü adlı oyun, hayatının yönünü değiştirdi. Oyunculuğa yönelmeye karar veren İşler, Eskişehir’de konservatuvar sınavına girerek bu alana ilk adımını attı. Daha sonra İstanbul’a dönerek Mimar Sinan Güzel Sanatlar Üniversitesi Devlet Konservatuvarı’nda eğitim aldı ve 1995 yılında mezun oldu. Öğrencilik yıllarında hem devlet tiyatrolarında hem de televizyon projelerinde sahne aldı.
Mezuniyetinin ardından arkadaşlarıyla birlikte “Kahramanlar ve Soytarılar Tiyatrosu”nu kurarak tiyatro üretimine devam etti. Aynı dönemde yazarlıkla da ilgilenerek Tuhaf Şehir Hikayeleri, Biz Zavallı Erkekler ve Yalnızlık Benim Gizli Sevgilim adlı eserleri kaleme aldı.
Televizyon kariyerine Gurur ile başlayan İşler; Deli Yürek, Şehnaz Tango ve Aşk ve Gurur gibi yapımlarda rol aldı. Geniş kitleler tarafından tanınması ise Gülbeyaz ve Aliye dizileriyle oldu.
Sinemada ilk kez Eylül Fırtınası ile izleyici karşısına çıkan oyuncu, Mustafa Hakkında Her Şey ve Anlat İstanbul gibi yapımlarla kariyerini sürdürdü. 2000’li yıllarda Yaşamın Kıyısında, Barda ve Yumurta gibi filmlerde yer aldı.
Televizyonda ise Bıçak Sırtı, Kapalıçarşı, Keşanlı Ali Destanı ve İntikam gibi projelerde başrol oynadı. Oyunculuk anlayışında şöhretten ziyade işini en iyi şekilde yapmayı hedefleyen İşler, tiyatroya olan bağlılığını her fırsatta dile getirmiştir.